[发明专利]一种ELP-Ⅲ型胶原蛋白的纯化方法及应用在审
| 申请号： | 202011286904.7 | 申请日： | 2020-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN112500495A | 公开（公告）日： | 2021-03-16 |
| 发明（设计）人： | 张杰 | 申请（专利权）人： | 点斗基因科技（南京）有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/70;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C12N5/077;A61K8/65;A61Q19/08;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京智造力知识产权代理有限公司 32382 | 代理人： | 杜丹 |
| 地址： | 210019 江苏省南京*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种类弹性蛋白(Elastin‑like polypeptides，ELPs)和Ⅲ型胶原蛋白(collagen Ⅲ)的融合蛋白的纯化和复性的方法。本发明将类弹性蛋白标签ELP100与Ⅲ型胶原蛋白多肽基因连接到原核表达载体pRELPN上，构建成pRELPN‑CLP Ⅲ‑ELP100融合蛋白表达载体，该载体在BL21(DE3)大肠杆菌中高表达。由于该蛋白在大肠杆菌中以胞内包涵体的形式存在，所以我们采用包涵体纯化和复性的方法来对该融合蛋白进行纯化和复性，包括如下步骤：菌种的收集与破碎，洗除杂蛋白、脂质和核酸，蛋白精纯化，滴定稀释法复性，ITC纯化和MTT细胞法活性鉴定，本方法纯化得率高、方法简单，适合于大规模生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 elp 胶原 蛋白 纯化 方法 应用 | ||
【主权项】：
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