[发明专利]一种PD-1敲除的CD19CAR-T细胞的构建方法有效
申请号: | 202011338905.1 | 申请日: | 2020-11-25 |
公开(公告)号: | CN112458116B | 公开(公告)日: | 2023-04-14 |
发明(设计)人: | 刘爽;张青;张普民 | 申请(专利权)人: | 广州重磅生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N5/10 |
代理公司: | 北京华清迪源知识产权代理有限公司 11577 | 代理人: | 孙志一 |
地址: | 510700 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种PD‑1基因敲除的CD19CAR‑T细胞的构建方法,所述方法包括:采用Nucleofector细胞核技术,将含有CD19的单链抗体可变区基因片段的PiggyBac载体质粒Piggybac‑CAR‑CD19,转座酶表达质粒Piggybac Transposase,含有能成功靶向PD1基因的sgRNA表达质粒pGL3‑U6‑hPD1sg1,以及pST1374‑NLS‑flag‑Cas9‑ZF质粒共转染入T细胞,得到PD‑1基因敲除的CD19 CAR‑T细胞。本发明实验证明:PD‑1敲除的免疫细胞较PD‑1未敲除的CD19 CAR‑T细胞,具有更高的细胞杀伤能力。 | ||
搜索关键词: | 一种 pd cd19car 细胞 构建 方法 | ||
【主权项】:
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