[发明专利]一种基于CRISPR-Cas9系统构建EPB41基因敲除THP-1细胞系的方法在审

专利信息
申请号: 202011374637.9 申请日: 2020-11-30
公开(公告)号: CN112481305A 公开(公告)日: 2021-03-12
发明(设计)人: 乔凯旋;郑永唐;刘鑫;刘丰亮;范雪刚 申请(专利权)人: 郑州大学;中国科学院昆明动物研究所
主分类号: C12N15/867 分类号: C12N15/867;C12N15/12;C12N5/10;C12R1/91
代理公司: 昆明科众知识产权代理事务所(普通合伙) 53218 代理人: 方金敏
地址: 450001 *** 国省代码: 河南;41
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摘要: 发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9系统构建EPB41基因敲除THP‑1细胞系的方法。本发明方法以人EPB41基因第一外显子中的蛋白编码序列,第四外显子和第七外显子中的蛋白编码序列中符合5‘‑G‑N18‑NGG‑3或5‘‑G‑N20‑NGG‑3’或5’‑CCN‑N18‑C‑3’或5’‑CCN‑N20‑C‑3’序列规则排列的片段的“N18或N20”为靶序列;得到随着细胞的分裂、增殖传递到下一代,形成稳定的敲除EPB41基因的THP‑1细胞系。实验证明,本发明所得的敲除EPB41基因的THP‑1细胞系不能正确的表达4.1R蛋白。研究蛋白4.1R缺失对细胞膜功能的影响,也可用于研究蛋白4.1R与一些免疫反应或其它信号通路蛋白分子直接或间接的相互作用。
搜索关键词: 一种 基于 crispr cas9 系统 构建 epb41 基因 thp 细胞系 方法
【主权项】:
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