[发明专利]一种尿苷二磷酸葡萄糖醛酸的制备方法

摘要

本发明涉及一种尿苷二磷酸葡萄糖醛酸的制备方法。本发明利用尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶氧化尿苷二磷酸葡萄糖生成尿苷二磷酸葡萄糖醛酸，同时加入乳酸脱氢酶进行双酶偶联反应，实现NAD+的循环再生，减少NAD+的添加，节约了成本，与此同时NAD+/NADH的循环减少副产物NADH对产物尿苷二磷酸葡萄糖醛酸的反馈抑制作用，目标产物的生成量可达到1.01mg/mL。本发明对乳酸脱氢酶的核苷酸序列进行优化改造，使得目的蛋白能更好的在大肠杆菌中表达，有利于高效合成目标产物尿苷二磷酸葡萄糖醛酸。本发明采用体外反应，反应体系更加可控，相比胞内反应，体外反应可在限定条件下更利于反应的进行。