[发明专利]一种ssODN介导的牡蛎基因组定点突变或插入的方法在审
| 申请号： | 202110165135.3 | 申请日： | 2021-02-06 |
| 公开（公告）号： | CN112831498A | 公开（公告）日： | 2021-05-25 |
| 发明（设计）人： | 于红;李琪;李绘娟 | 申请（专利权）人： | 中国海洋大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N9/22;C12N15/89;C12N15/90 |
| 代理公司： | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人： | 刘艳青 |
| 地址： | 266100 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种ssODN介导的牡蛎基因组定点突变或插入的方法，包括：合成外源供体模板‑单链寡核苷酸；体外转录合成CRISPR/Cas9系统，该系统包括Cas9 mRNA和靶基因sgRNA；然后将ssODN、Cas9 mRNA、靶基因sgRNA和非同源修复抑制剂KU5778进行混合得到混合物，利用显微注射方法将该混合物导入至牡蛎受精卵中。本发明利用ssODN介导结合CRISPR/Cas9基因编辑技术，以牡蛎为研究对象针对性地设计ssODN序列，并确定该序列的长度，最终通过显微注射成功实现了牡蛎的基因组定点突变或插入。本发明为以后开展牡蛎基因功能研究和遗传改良提供了强有力的技术支持。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 ssodn 牡蛎 基因组 定点 突变 插入 方法 | ||
【主权项】：
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