[发明专利]基于CRISPRCas9连续基因编辑方法有效
| 申请号： | 202110220450.1 | 申请日： | 2021-02-26 |
| 公开（公告）号： | CN113046379B | 公开（公告）日： | 2023-03-31 |
| 发明（设计）人： | 雍金贵;崔康乐;王维坤;骆晓雯;纪世春 | 申请（专利权）人： | 通用生物（安徽）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/65;C12R1/19 |
| 代理公司： | 合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙) 34160 | 代理人： | 刘生昕 |
| 地址： | 239000 安徽省滁*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于CRISPRCas9连续基因编辑方法，首先将CRISPRCas9质粒pRedCas9‑N20转入目的菌株，再将体外扩增的带有PAM以及抗性marker序列的donor片段导入大肠杆菌，配合CRISPRCas9质粒基于Red同源重组将带有PAM序列的donor整合入基因组，再通过配合CRISPRCas9对PAM序列进行切割，再进行同源重组DSB修复，将标记maker消除，以及基因组无痕编辑，如果还需继续编辑，只需重新设计线性片段，无需再设计PAM序列，同样用于编辑使用的质粒可大量准备，用于多个菌株编辑，且本发明编辑效率高，单基因编辑时间短，编辑出的PAM序列固定。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 crisprcas9 连续 基因 编辑 方法 | ||
【主权项】：
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