[发明专利]稳定表达生物素连接酶Bir A的细胞株制备方法及其应用在审
| 申请号： | 202110288528.3 | 申请日： | 2021-03-17 |
| 公开（公告）号： | CN113061589A | 公开（公告）日： | 2021-07-02 |
| 发明（设计）人： | 韩照中;潘红芽 | 申请（专利权）人： | 领诺（上海）医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/00 | 分类号： | C12N9/00;C12N15/85;C12N5/10;C12P21/00 |
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| 地址： | 201203 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种稳定表达生物素连接酶Bir A的细胞株制备方法及其在重组蛋白体内定点生物素化中的应用。本发明提供了该细胞株的构建方法及其应用实例：将Bir A基因插入真核表达载体；转染宿主细胞得到稳定表达BirA的细胞系；构建带Avi‑蛋白纯化联合标签的重组蛋白表达载体；转染BirA细胞系用于生产体内定点生物素化蛋白。本发明的独特之处在于实现了BirA基因在真核哺乳动物细胞内表达和重组蛋白体内定点生物素化；选用HEK 293F为宿主细胞，便于在生产重组蛋白的同时进行细胞内的定点生物素化，提高了后续进行生物学功能检测的效率；提供了应用HEK 293F‑Bir A细胞株生产体内生物素化重组蛋白检测、鉴定的基本方法和技术途径。 | ||
| 搜索关键词： | 稳定 表达 生物素 连接酶 bir 细胞株 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
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