[发明专利]一种水曲柳高效遗传转化方法在审
申请号: | 202110311143.4 | 申请日: | 2021-03-24 |
公开(公告)号: | CN113046386A | 公开(公告)日: | 2021-06-29 |
发明(设计)人: | 齐凤慧;汤明硕;王雯萱;詹亚光;曾凡锁;刘林 | 申请(专利权)人: | 东北林业大学 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H5/00;A01H6/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 150040 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 本发明公开了一种水曲柳高效遗传转化方法,选取水曲柳种子浸泡24h,去掉外种皮,表面消毒后进行预培养,在预培养时加柠檬酸钾,将预培养之后的成熟合子胚子叶部分及胚根部分切去,剩余的下胚轴放入WY4培养基中,密封好后,放入超声波清洗机中超声90s,把WY4培养基倒掉,将下胚轴与OD600=0.6的农杆菌菌液混合后密封好,放入真空装置中,真空泵开启后约3min,真空压力达到0.8Mpa,在此压力下持续10‑15min,关闭真空泵开关,打开阀门,2min后恢复为标准大气压,在超净工作台中将下胚轴取出,无菌滤纸吸去多余菌液后,将下胚轴接入不定芽诱导培养基中,之后按照常规方法进行共培养、脱菌、选择培养、PCR检测,确定转基因植株。该方法的建立,一方面可用于提高水曲柳的转化效率,达到遗传转化的要求;其次,可以用于水曲柳遗传转化辅助育种;第三,也可以通过遗传转化筛选突变体,获得优良品种。 | ||
搜索关键词: | 一种 水曲柳 高效 遗传 转化 方法 | ||
【主权项】:
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