[发明专利]一种椎间盘单细胞的分离方法在审
| 申请号： | 202110345193.4 | 申请日： | 2021-03-31 |
| 公开（公告）号： | CN113025567A | 公开（公告）日： | 2021-06-25 |
| 发明（设计）人： | 甘翼搏;刘鹏;朱军;胡欧;王钟 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军陆军特色医学中心 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 重庆鼎慧峰合知识产权代理事务所(普通合伙) 50236 | 代理人： | 朱浩 |
| 地址： | 400042 重*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明公开提供了一种椎间盘单细胞分离方法，包括：获得活体椎间盘组织样本，于生物洁净工作台去除混杂组织及血液，分离终板、纤维环和髓核，得到单一组织样本；将单一组织样本依次以胰蛋白酶、链霉蛋白酶、Ⅱ型胶原酶消化，得组织悬液；将组织悬液经过滤得细胞悬液，再离心弃上清后以红细胞裂解液重悬处理，然后再通过磁珠分选法或流式细胞分选法分选，即得单细胞样本。本发明提供的椎间盘单细胞分离方法首次采用高特异性酶消化及细胞分选策略，充分消化细胞外基质,高效去除消化残留杂质及细胞双倍体,在未经过体外扩增培养的条件下,获得代表椎间盘细胞体内真实表达及分布的、高纯度、高活力、满足单细胞测序建库标准的椎间盘单细胞原代(P0)代细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 椎间盘 单细胞 分离 方法 | ||
【主权项】：
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