[发明专利]一种茎环引物辅助的等温核酸扩增方法有效
申请号: | 202110361417.0 | 申请日: | 2021-04-02 |
公开(公告)号: | CN112980928B | 公开(公告)日: | 2023-07-18 |
发明(设计)人: | 罗光成;易婷婷;郭晓兰;张国元 | 申请(专利权)人: | 川北医学院附属医院 |
主分类号: | C12Q1/6844 | 分类号: | C12Q1/6844 |
代理公司: | 南充聚力三新知识产权代理有限责任公司 51207 | 代理人: | 刘东 |
地址: | 637000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 一种茎环引物辅助的等温核酸扩增技术,其特征在于,按下列步骤进行:a、SPA的引物设计:首先针对模板设计两条普通引物,即正向引物FP和反向引物BP;b、设计好普通引物后,再在FP和BP的5’端添加茎环序列,形成一对茎环引物,即正向茎环引物SFP和反向茎环引物SBP;c、SPA引物混合液液配制:SPA的扩增引物由普通引物FP、BP和茎环引物SFP、SBP混合而成;d、SPA缓冲液配制2×SPAMix:称取氯化钾,硫酸铵,七水硫酸镁,甜菜碱,Tris‑HCl,dNTP,1.0mL100倍稀释的SYBR green Ⅰ,吐温‑20,充分溶解并定容,每管分装‑20°C保存;e、SPA反应液配制:SPA反应为10‑50µL体系。本方法具有操作简单、快速灵敏、经济实惠等优点,可实现核酸的快速扩增和检测,特别适用于现场检测和快速筛查。 | ||
搜索关键词: | 一种 引物 辅助 等温 核酸 扩增 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
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