[发明专利]一种脑转移相关基因的CRISPR/Cas9文库高通量筛选方法在审
| 申请号： | 202110390689.3 | 申请日： | 2021-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN112921072A | 公开（公告）日： | 2021-06-08 |
| 发明（设计）人： | 张剑;林明曦;金奕滋 | 申请（专利权）人： | 复旦大学附属肿瘤医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6809 | 分类号： | C12Q1/6809;C12Q1/6886;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海容慧专利代理事务所(普通合伙) 31287 | 代理人： | 于晓菁 |
| 地址： | 200032 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种脑转移相关候选基因的CRISPR/Cas9文库高通量筛选方法，该方法包括构建脑转移相关基因的sgRNA文库，将sgRNA文库进行慢病毒包装，感染稳定表达CAS9蛋白的宿主细胞，并筛选以获得稳定表达sgRNA文库的细胞，然后，将慢病毒感染后的细胞接种于免疫缺陷的小鼠颅内及脂肪垫，最后，将颅内成瘤及皮下成瘤的肿瘤组织取出，提取基因组DNA后，对sgRNA的靶向区进行二代测序建库，通过筛选前后sgRNA的丰度变化，进而找出脑转移相关候选基因。该方法建立了脑转移相关基因高通量筛选技术，能够准确、高效地挖掘调控脑转移的关键基因，为脑转移预防和治疗提供新靶点、新途径。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 转移 相关 基因 crispr cas9 文库 通量 筛选 方法 | ||
【主权项】：
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