[发明专利]基于体外转录和G4-ThT的荧光传感器及其制备与在HBV DNA检测上的应用

摘要

本发明公开了一种基于体外转录和G4‑ThT的荧光传感器及其制备与在HBV DNA检测上的应用，包括引物1、引物2、两种酶和硫黄素ThT；在逆转录酶作用下靶链与引物1杂交生成第一种DNA双链中间体，该中间体在T7 RNA聚合酶催化作用下体外转录扩增产生短单链RNA；引物2与RNA单链杂交形成RNA‑cDNA，然后在AMV反转录酶的作用下逆转录形成cDNA，得带有富C链的DNA；之后引物1又与带有富C链的DNA杂交生成第二种DNA双链中间体，然后在T7 RNA聚合酶作用下转录出带有RNAG4链的RNA，以此循环反应；RNAG4与硫黄素结合，增强荧光信号，收集荧光信号实现对HBV DNA的检测。本传感器灵敏度高、稳定性强、重现性好。