[发明专利]鸡DF-1细胞IHH基因敲除稳定细胞株的构建方法及其特异性sgRNA在审
| 申请号： | 202110503416.5 | 申请日： | 2021-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN113151277A | 公开（公告）日： | 2021-07-23 |
| 发明（设计）人： | 金四华;徐媛;税斐;耿照玉;何培莉;高伟凤;夏晶晶;贾羽晴;江洪峰;郑书丽 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/55;C12N5/10;C12N15/66;C12R1/91 |
| 代理公司： | 合肥中谷知识产权代理事务所(普通合伙) 34146 | 代理人： | 洪玲 |
| 地址： | 230000 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种鸡DF‑1细胞IHH基因敲除稳定细胞株的构建方法及其特异性sgRNA，本发明最核心最关键的技术是构建靶向鸡IHH基因的合理有效的sgRNA，将sgRNA与CRISPR/Cas9基因敲除载体结合，通过脂质体转染的方式转入鸡DF‑1细胞，沉默IHH基因表达，再通过流式分选获得单克隆细胞，即为鸡DF‑1细胞IHH基因敲除稳定细胞株。通过本发明成功构建了一种基于CRISPR/Cas9方法建立敲除鸡IHH基因的方法，获得靶向鸡IHH的sgRNA和IHH基因敲除DF‑1阳性单克隆细胞株。本发明构建的鸡IHH基因敲除细胞系可用于后续对IHH基因功能的相关研究，为鸡匍匐性状研究提供了一个细胞模型，为后续基因功能进一步研究奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | df 细胞 ihh 基因 稳定 细胞株 构建 方法 及其 特异性 sgrna | ||
【主权项】：
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