[发明专利]一种在大肠杆菌内稳定遗传的酵母-大肠杆菌穿梭质粒及其构建方法在审
申请号: | 202110579577.2 | 申请日: | 2021-05-26 |
公开(公告)号: | CN113373171A | 公开(公告)日: | 2021-09-10 |
发明(设计)人: | 蔡文通;李干武;步志高;赵东明 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N15/70;C12N15/66 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 马鑫 |
地址: | 150009 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 本发明公开了一种在大肠杆菌内稳定遗传的酵母‑大肠杆菌穿梭质粒及其构建方法。所述的穿梭质粒是基于细菌‑酵母人工染色体,从pGEN‑MCS质粒上通过PCR扩增得到hok‑sok和par元件,然后通过连接将稳定遗传元件hok‑sok和parA构建入细菌‑酵母人工染色体中,进而获得方便克隆长片段DNA、无抗性且在大肠杆菌内稳定遗传的酵母‑大肠杆菌穿梭质粒。优选的,所述的穿梭质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的穿梭质粒载体,不但可实现酵母、细菌内穿梭,可在酵母中通过同源重组进行多片段DNA组装,还可以稳定的在大肠杆菌中复制、遗传,便于进行DNA提取。 | ||
搜索关键词: | 一种 大肠杆菌 稳定 遗传 酵母 穿梭 质粒 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
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