[发明专利]一种使用IMAC层析纯化非标签化CRM197蛋白的方法有效
| 申请号： | 202110624063.4 | 申请日： | 2021-06-04 |
| 公开（公告）号： | CN113402592B | 公开（公告）日： | 2023-08-01 |
| 发明（设计）人： | 魏鑫;侯文礼;黄杰;孙俊;陈邱;李松;赖艺;薛冰;冯晓 | 申请（专利权）人： | 成都康华生物制品股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/34 | 分类号： | C07K14/34;C07K1/22 |
| 代理公司： | 成都东唐智宏专利代理事务所(普通合伙) 51261 | 代理人： | 罗言刚 |
| 地址： | 610000 四川省*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种使用IMAC层析纯化非标签化CRM197蛋白的方法，包括如下步骤：（1）将大肠杆菌表达系统得到非标签化的CRM197蛋白包涵体用变性剂处理，（2）过滤后上样IMAC层析柱，使用洗脱液洗脱，收集洗脱峰，（3）用复性液复性及超滤浓缩，（4）然后进行分子筛层析或疏水层析，获得CRM197蛋白。本发明不需要添加His标签，只需要对蛋白进行变性处理，从而打开蛋白结构使蛋白结构内部的His暴露出来，从而增加与金属离子的结合能力，然后根据适当的洗脱步骤将目的蛋白与杂质分离，该技术方案特别适用于包涵体的纯化，一步层析就能得到纯度大于90%的样品。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 使用 imac 层析 纯化 标签 crm197 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
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