[发明专利]一种高效生产类克隆鸡的方法

摘要

本发明涉及一种高效生产类克隆鸡的方法，包括以下步骤：（1）、构建OCT4,SOX2,NANOG,LIN28四因子的慢病毒过表达载体并转染黑羽狼山鸡成纤维细胞CEF；（2）、利用诱导培养基将转染OSNL的狼山鸡成纤维细胞CEF诱导为iPSCs，对诱导形成的iPSCs进行传代并进行鉴定；（3）、利用诱导培养基将诱导形成的iPSCs进行诱导分化为PGC‑like，并进行鉴定；（4）、收集PGC‑like细胞并将其通过鸡胚血管注射的方法注射至孵化2.5天的隐性白羽鸡胚血管中，并通过冰冻切片方法确定PGC‑like能够在受体隐性白羽鸡中的迁移归巢；（5）、将注射黑羽狼山鸡PGC‑like细胞的隐性白羽受体鸡胚继续孵化至至出壳。通过微卫星技术证明黑羽后代来源于供体的PGC‑like细胞。通过本发明，可大量生产与供体遗传特征相同的类克隆鸡。