[发明专利]细菌来源的α-L-鼠李糖苷酶基因、基因表达及其应用

摘要

本发明涉及一种细菌来源的α‑L‑鼠李糖苷酶基因、基因表达及其应用，筛选出可以将北桑寄生总黄酮中鼠李素‑3‑O‑鼠李糖苷水解为鼠李素的细菌菌株鸟肠球菌（Enterococcus avium），通过对细菌中两种α‑L‑鼠李糖苷酶基因EaRha1和EaRha2进行克隆及原核表达，获得目标α‑L‑鼠李糖苷酶。通过对重组蛋白EaRha1和EaRha2酶学性质的研究，确定了两种蛋白对黄酮类化合物的水解机制，为黄酮类化合物的生物转化提供了理论基础和指导作用。以pNPR为底物，重组蛋白EaRha1最适pH是7，最适温度为50℃，能催化水解含有α‑1,2糖苷键的新橙皮苷和柚皮苷及含有α‑1,6糖苷键的芦丁。以鼠李素‑3‑O‑鼠李糖苷为底物，EaRha2的最适pH是7，最适温度为60℃，能水解鼠李素‑3‑O‑鼠李糖苷和槲皮苷。