[发明专利]基因位点定点插入基因条件性过表达模型构建方法在审

专利信息
申请号: 202110693413.2 申请日: 2021-06-22
公开(公告)号: CN113493807A 公开(公告)日: 2021-10-12
发明(设计)人: 王斌;王志飞;张现娟;王雅硕;王韵阳 申请(专利权)人: 青岛大学
主分类号: C12N15/90 分类号: C12N15/90;A01K67/027;C12N15/12
代理公司: 北京云嘉湃富知识产权代理有限公司 11678 代理人: 卞永如
地址: 266071 山东省*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明属于动物模型构建技术领域,公开了一种基因位点定点插入基因条件性过表达模型(Rosa26‑LSL‑IE2)构建方法,通过体外转录的方式,获得Cas9mRNA和gRNA;通过In‑Fusion cloning的方法构建同源重组载体donor vector;将Cas9mRNA、gRNA和donor vector显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,获得F0代小鼠;PCR扩增及测序鉴定阳性的F0代小鼠与C57BL/6J小鼠交配获得阳性F1代小鼠。本发明IE2转基因鼠的建模成功克服种属特异性,构建了能稳定持续表达ie2的机体环境。
搜索关键词: 基因 定点 插入 条件 表达 模型 构建 方法
【主权项】:
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