[发明专利]一种基于荧光偏振的去泛素化酶活性检测方法在审
| 申请号： | 202110903587.7 | 申请日： | 2021-08-05 |
| 公开（公告）号： | CN113514445A | 公开（公告）日： | 2021-10-19 |
| 发明（设计）人： | 易华伟;张嫦丽;王清清;范文;罗伟;辛陈琦 | 申请（专利权）人： | 荆州市第一人民医院（荆州市肿瘤医院;长江大学附属第一医院） |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;C12N15/70;C12N15/62;C12P21/02;C07K19/00;C12Q1/37 |
| 代理公司： | 荆州市技经专利事务所 42219 | 代理人： | 韩志刚 |
| 地址： | 434000 *** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种基于荧光偏振的去泛素化酶活性检测方法。所述方法包括如下步骤：1、去泛素化酶检测探针的制备，包括制备融合蛋白Ub‑linker‑Cys、连接BODIPY探针、质谱检测；2、检测去泛素化酶的活性，包括选择去泛素化酶、去泛素化对探针FP值的影响、实时检测去泛素化酶的活性。该检测方法是基于检测荧光偏振，荧光偏振检测的是平行方向和垂直方向荧光强度的比例关系，其不易受荧光探针的浓度、溶液温度和pH以及其他荧光信号的干扰，在测量去泛素化酶的活性时，步骤简单、耗时短，且探针和去泛素化酶的用量少。此外，该方法中制备的探针也可用于去泛素化酶抑制剂的筛选，且是高通量的。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 荧光 偏振 去泛素化酶 活性 检测 方法 | ||
【主权项】：
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