[发明专利]一种获取高产高稳定性异源β-葡萄糖苷酶的方法有效
申请号: | 202111385602.X | 申请日: | 2021-11-22 |
公开(公告)号: | CN113980938B | 公开(公告)日: | 2023-06-27 |
发明(设计)人: | 钟耀华;孙雨;沈林静;钱远超 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12N15/80;C12N15/31;C12N1/15;C12R1/885 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 李健康 |
地址: | 266237 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种获取高产高稳定性异源β‑葡萄糖苷酶的方法,步骤是制备vib1敲除表达盒,将该表达盒转化进入里氏木霉QM53的原生体中构建蛋白背景降低的里氏木霉底盘菌株Δvib1,制备黑曲霉来源β‑葡萄糖苷酶(BGLA)过表达盒并转化底盘菌株Δvib1构建表达异源β‑葡萄糖苷酶的工程菌株QVB‑1,优化培养条件发酵菌株QVB‑1生产β‑葡萄糖苷酶。实验证实利用本发明方法生产的异源β‑葡萄糖苷酶活性为65.4IU/mg,显著高于出发菌株QM53(1.1IU/mg),并且胞外背景更加纯净,蛋白纯度高。同时本发明的方法能保持异源β‑葡萄糖苷酶稳定性,菌株QVB‑1的发酵上清液孵育4周后,其分泌的β‑葡萄糖苷酶活力保持稳定不变,而对照组β‑葡萄糖苷酶活力下降程度超过放置前的60%。本发明应用前景良好。 | ||
搜索关键词: | 一种 获取 高产 稳定性 葡萄 糖苷酶 方法 | ||
【主权项】:
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