[发明专利]一种基于病毒加帽酶的稳定T7表达系统及其在真核生物中表达蛋白质的方法

摘要

本发明涉及一种基于病毒加帽酶的稳定T7表达系统及其在真核生物中表达蛋白质的方法。所述稳定T7表达系统包含T7 RNA聚合酶、T7转录单元和病毒加帽酶，所述T7转录单元由T7启动子、T7终止子和目标基因构成。所述方法包括将T7 RNA聚合酶整合到宿主基因组，将T7启动子启动的转录单元构建到载体或基因组，利用病毒加帽酶为T7 RNA聚合酶合成的mRNA加5′Cap结构，帮助T7 RNA聚合酶转录的mRNA运输到细胞质，并在细胞质与核糖体结合，完成翻译和高水平表达目标蛋白质。本发明的基于病毒加帽酶的T7表达系统不随宿主细胞的分裂而丢失，在真核生物中高效稳定地表达外源蛋白。