[发明专利]一种基于CRISPR-Cpf1的高效基因编辑系统的构建在审
| 申请号： | 202111466182.8 | 申请日： | 2021-12-03 |
| 公开（公告）号： | CN114250245A | 公开（公告）日： | 2022-03-29 |
| 发明（设计）人： | 周哲敏;崔文璟;郝文亮;韩来闯;程中一;刘中美;周丽;郭军玲;叶乘锋 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/75 | 分类号： | C12N15/75;C12N15/55;C12N1/21;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 仇钰莹 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cpf1的高效基因编辑系统的构建，属于基因工程技术领域。本发明首先表征了来自于F.novicida的Cas蛋白Cpf1，将FnCpf1整合到枯草芽孢杆菌基因组的lacA位点。靶向不同基因的crRNA，将该crRNA置于枯草芽孢杆菌来源的强组成型启动子Pveg的下游，用于高强度表达对应的crRNA。通过选用不同靶向基因的crRNA，该基因组编辑方法被验证。菌落PCR结果显示，sacA基因，ligDV基因以及pps基因簇均能够实现高效的敲除。同时，为了验证该系统的敲入效率，外源基因sfGFP被高效敲除到sacA位点。为了进一步验证该系统的多基因敲除效率，本发明选择了sacA和aprE作为靶标，菌落PCR结果显示出了高效的敲除效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 crispr cpf1 高效 基因 编辑 系统 构建 | ||
【主权项】：
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