[发明专利]磷酸激酶辅助的DNA中5-羟甲基尿嘧啶修饰定位分析方法和试剂盒

摘要

本发明提供了一种磷酸激酶辅助的DNA中5‑羟甲基尿嘧啶修饰定位分析方法和试剂盒，所述方法包括：采用5‑羟甲基尿嘧啶磷酸激酶5hmUDK蛋白对DNA进行磷酸化反应，获得磷酸化DNA样品；将所述磷酸化DNA样品进行点击化学反应以进行生物素标记，获得标记后样品；将所述标记后样品通过链霉亲和素磁珠的富集后进行测序，获得5‑羟甲基尿嘧啶的位点信息。本发明利用5hmUDK将带有叠氮基团的磷酸根转移到5hmU上，再利用生物正交反应将5hmU生物素化，最后通过链霉亲和素磁珠的富集和高通量测序的方法对DNA中的5hmU修饰进行定位。该方法富集倍数高、操作简便，可以有效地对DNA中的5hmU修饰进行定位。