[发明专利]一种重组蛋白酶K的纯化方法及其应用在审
申请号: | 202210011678.4 | 申请日: | 2022-01-06 |
公开(公告)号: | CN114410613A | 公开(公告)日: | 2022-04-29 |
发明(设计)人: | 罗强;丁海平;李坤 | 申请(专利权)人: | 合肥巅峰生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/58 | 分类号: | C12N9/58 |
代理公司: | 合肥四阅专利代理事务所(普通合伙) 34182 | 代理人: | 李苏 |
地址: | 230000 安徽省合肥市*** | 国省代码: | 安徽;34 |
权利要求书: | 暂无信息 | 说明书: | 暂无信息 |
摘要: | 本发明提供了一种重组蛋白酶K的纯化方法,包括以下步骤:往重组蛋白酶K发酵液中加入缓冲液A,混匀后一次超滤,获得已去除金属离子和分子量小于20KDa杂蛋白的超滤液;将步骤S1中得到的超滤液泵入用缓冲液A平衡的离子亲和层析胶中,层析胶放置于纯化桶中,后续搅拌便于层析胶和蛋白酶k结合,随后沉降,蠕动泵去除上清液,随后用缓冲液A复平衡后用静置,再用蠕动泵去除上清,加入缓冲液B搅拌沉降,蠕动泵去除上清,再加入缓冲液C,搅拌沉降,蠕动泵去除上清,再用缓冲液D洗脱,收集洗脱液;往洗脱液中加入缓冲液E,混匀后二次超滤,即可。本发明提供的重组蛋白酶K的纯化方法,纯化速度迅速;且对设备要求低,能耗低。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 蛋白酶 纯化 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
暂无信息
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