[发明专利]一种制备半滑舌鳎精巢单细胞悬液的方法有效
申请号: | 202210035927.3 | 申请日: | 2022-01-12 |
公开(公告)号: | CN114381422B | 公开(公告)日: | 2023-09-08 |
发明(设计)人: | 刘响;张向辉;王洪岩;陈建阳;黄英毅;卢怡芳;邵长伟 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
主分类号: | C12N5/076 | 分类号: | C12N5/076;C12N5/071 |
代理公司: | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人: | 沈小明 |
地址: | 266071 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种制备半滑舌鳎精巢单细胞悬液的方法,属于细胞生物学领域,所述方法为取半滑舌鳎精巢组织,并用DMEM‑Nacl溶液冲洗组织,然后切碎匀浆;将酶混合溶液加入组织匀浆中,30℃水浴酶解消化5‑10min,显微镜下观察直至组织块基本消失;将消化后的细胞悬液用40μm细胞筛过滤;对滤过液进行第一次离心,收集细胞沉淀物,再加入PBS‑Nacl溶液重悬细胞,第二次离心,重复两次;将体积比0.1%BSA‑PBS‑Nacl溶液加入洗涤后的细胞沉淀中,重新悬浮细胞,即获得半滑舌鳎精巢单细胞悬液。本发明方法获得半滑舌鳎精巢单细胞悬液,并保证解离的细胞浓度为1000‑2000个/μL,活率大于80%。 | ||
搜索关键词: | 一种 制备 舌鳎 精巢 单细胞 方法 | ||
【主权项】:
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