[发明专利]一种IPTG诱导人干扰素IFNG蛋白表达的方法在审
| 申请号： | 202210264968.X | 申请日： | 2022-03-17 |
| 公开（公告）号： | CN114561414A | 公开（公告）日： | 2022-05-31 |
| 发明（设计）人： | 鲍加琪;安然 | 申请（专利权）人： | 合肥同勉生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/23;C07K14/57;C12P21/02 |
| 代理公司： | 上海恩凡知识产权代理有限公司 31459 | 代理人： | 汪贺玲 |
| 地址： | 230000 安徽省合肥市中国（安徽）自由贸易试验*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种IPTG诱导IFN‑γ重组蛋白表达的方法，具体步骤如下：将pET28a‑IFN‑γ原核表达载体，转化大肠杆菌BL21(DE3)，经过选择性培养、单克隆液体培养、PCR检测，选择带有目的条带的菌液，转接培养；在转接培养的菌液中加入IPTG，在IPTG终浓度0.1‑1.0mol/L条件下，10‑37℃诱导IFN‑γ蛋白表达4‑8小时；取制得的菌液，离心，弃上清；在沉淀中加入loading buffer混匀，100℃加热10min；离心，得到IFN‑γ蛋白的上清液。在最佳诱导条件下能极大提高IFN‑γ在原核细胞中的表达量，为制备IFN‑γ单克隆抗体和相关研究奠定了良好的基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 iptg 诱导 干扰素 ifng 蛋白 表达 方法 | ||
【主权项】：
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