[发明专利]一种利用DNA聚合酶和DNA连接酶便捷制备含非天然碱基核酸链的方法及其应用在审
| 申请号： | 202210346898.2 | 申请日： | 2022-04-02 |
| 公开（公告）号： | CN116926148A | 公开（公告）日： | 2023-10-24 |
| 发明（设计）人： | 陈庭坚;白静思;邹金容;曹懿君;吴静;郑鑫倩 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 林奕聪 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明公开一种利用DNA聚合酶和DNA连接酶便捷制备含非天然碱基核酸链的方法及其应用。该方法为将模板链、上游结合链和下游结合链与聚合酶反应缓冲液充分混合得到混合液Ⅰ、变性后，退火；加入非天然核苷三磷酸和DNA聚合酶，得到混合液Ⅱ，孵育，孵育结束后热处理变性聚合酶；将反应液纯化，得到中间混合产物A；将中间混合产物A与ATP、DNA连接酶混合在反应体系中，得到混合液Ⅲ，孵育后纯化，得到中间混合产物B；将中间混合产物B和亲和纯化磁珠混合在缓冲液中；将混合液用缓冲液多次洗涤，并用碱处理分离模板链，得到混合液Ⅳ；洗涤混合液Ⅳ后，加甲酰胺热孵育磁珠，得到混合液Ⅴ；纯化，得到含有非天然碱基的ssDNA。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 dna 聚合 连接酶 便捷 制备 天然 碱基 核酸 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
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