[发明专利]一种用于基因多态性分型的鉴定方法及其应用

摘要

本发明公开了一种用于基因多态性分型的鉴定方法及其应用，包括如下步骤：S1、根据待检测样品中不同多态性位点的基因序列，分别设计两条对应所述不同多态性位点的特异性引物ASP1和ASP2，以及一条通用反向引物LSP；S2、分别在所述特异性引物ASP1和ASP2中嵌入一段额外序列GC‑add和AT‑add，并且所述特异性引物ASP1和ASP2的3＇末端碱基分别和待检测样品中的不同多态性位点匹配；S3、配制PCR反应体系，加入相应试剂后，进行AS‑PCR扩增反应；S4、扩增反应完成后，通过熔解曲线分析，即可完成对待检测样品基因分型鉴定。本发明中通过调整GC‑add或AT‑add序列的长度和在引物中的嵌入位置来平衡ASP1和ASP2的扩增效率，从而成功消除杂合基因型样品检测中的不均一扩增现象。