[发明专利]一种靶向抑制RNA聚合酶I的小分子化合物的筛选方法及应用在审
申请号: | 202210967527.6 | 申请日: | 2022-08-12 |
公开(公告)号: | CN115261408A | 公开(公告)日: | 2022-11-01 |
发明(设计)人: | 吴朵;施松;贺虎;刘颂 | 申请(专利权)人: | 杭州圣域生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/65;C12Q1/02;C12Q1/6851;C12Q1/6888;A61K31/7056;A61K31/706;A61P35/00 |
代理公司: | 杭州中利知识产权代理事务所(普通合伙) 33301 | 代理人: | 韩洪 |
地址: | 310000 浙江省杭州市余杭区仓前*** | 国省代码: | 浙江;33 |
权利要求书: | 暂无信息 | 说明书: | 暂无信息 |
摘要: | 本发明公开了一种靶向抑制RNA聚合酶I的小分子化合物的筛选方法,依次包括以下步骤:a)FBL全长ORF基因克隆;b)将FBL全长ORF基因连接pEGFP‑C1载体得到重组质粒;c)重组质粒测序验证获取正确质粒;d)正确质粒转染HeLa细胞;e)筛选出能稳定表达EGFP‑FBL蛋白的HeLa细胞;f)判断EGFP‑FBL是否聚集,否则转入g步骤,是则转入h步骤;g)提示该小分子不造成核仁应激,不予考虑,然后结束;h)验证45S pre‑rRNA水平是否降低,且不影响GAPDH mRNA转录,是则转入i步骤,否则结束;i)筛选出有效抑制RNA聚合酶I的小分子化合物,提示为Pol Ii,然后结束。本发明具有操作简单、可进行高通量筛选,荧光定量PCR方法检测灵敏度高、特异性强,筛选出的RNA聚合酶I小分子抑制剂有望进一步开发成为新型、靶向RNA聚合酶I的抗癌化疗药物。 | ||
搜索关键词: | 一种 靶向 抑制 rna 聚合 分子 化合物 筛选 方法 应用 | ||
【主权项】:
暂无信息
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