[发明专利]一种无模板DNA酶促合成方法在审
申请号: | 202211622358.9 | 申请日: | 2022-12-16 |
公开(公告)号: | CN116355979A | 公开(公告)日: | 2023-06-30 |
发明(设计)人: | 贺建奎;李周芳;徐国伟 | 申请(专利权)人: | 贺建奎 |
主分类号: | C12P19/34 | 分类号: | C12P19/34;C12N15/10 |
代理公司: | 深圳市惠邦知识产权代理事务所 44271 | 代理人: | 李清 |
地址: | 518000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种无模板DNA酶促合成方法,包括将TdT酶和引发链分别固定在反应面板上的反应孔底部,调节第一反应缓冲液的pH值,使所述TdT酶完全没有催化活性,所述TdT酶的结合结构域不受影响;加入单一、设定量、预设的脱氧核苷酸,所述脱氧核苷酸与第二反应缓冲液混合加入,让脱氧核苷酸扩散到反应孔中,并且让TdT酶反应位置上只结合一个dNTP,此时TdT酶是非活性状态且不进行催化连接反应,dNTP只是占据了TdT酶的结合结构域以防止多余的dNTP连接到该位置;用第三反应缓冲液冲洗掉所有没有结合上去的dNTP,然后更换第四反应缓冲液,使TdT酶激活,从而催化dNTP连接反应开启,一个核苷酸就被成功加到了DNA反应链的末端,继续下一个循环。本发明可以延伸DNA链超过300nt。 | ||
搜索关键词: | 一种 模板 dna 合成 方法 | ||
【主权项】:
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