[发明专利]一种无模板DNA酶促合成方法在审

专利信息
申请号: 202211622358.9 申请日: 2022-12-16
公开(公告)号: CN116355979A 公开(公告)日: 2023-06-30
发明(设计)人: 贺建奎;李周芳;徐国伟 申请(专利权)人: 贺建奎
主分类号: C12P19/34 分类号: C12P19/34;C12N15/10
代理公司: 深圳市惠邦知识产权代理事务所 44271 代理人: 李清
地址: 518000 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明涉及一种无模板DNA酶促合成方法,包括将TdT酶和引发链分别固定在反应面板上的反应孔底部,调节第一反应缓冲液的pH值,使所述TdT酶完全没有催化活性,所述TdT酶的结合结构域不受影响;加入单一、设定量、预设的脱氧核苷酸,所述脱氧核苷酸与第二反应缓冲液混合加入,让脱氧核苷酸扩散到反应孔中,并且让TdT酶反应位置上只结合一个dNTP,此时TdT酶是非活性状态且不进行催化连接反应,dNTP只是占据了TdT酶的结合结构域以防止多余的dNTP连接到该位置;用第三反应缓冲液冲洗掉所有没有结合上去的dNTP,然后更换第四反应缓冲液,使TdT酶激活,从而催化dNTP连接反应开启,一个核苷酸就被成功加到了DNA反应链的末端,继续下一个循环。本发明可以延伸DNA链超过300nt。
搜索关键词: 一种 模板 dna 合成 方法
【主权项】:
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