[发明专利]一种Rnf157基因片段过表达稳转细胞株及其构建方法在审

专利信息
申请号: 202310487105.3 申请日: 2023-04-28
公开(公告)号: CN116676326A 公开(公告)日: 2023-09-01
发明(设计)人: 杨铁林;可汗;黄小婷;董珊珊;郭燕;段媛媛 申请(专利权)人: 西安交通大学
主分类号: C12N15/52 分类号: C12N15/52;C12N15/867;C12N15/66;C12N5/10
代理公司: 西安通大专利代理有限责任公司 61200 代理人: 贺小停
地址: 710049 陕*** 国省代码: 陕西;61
权利要求书: 暂无信息 说明书: 暂无信息
摘要: 发明公开了一种Rnf157基因片段过表达稳转细胞株及其构建方法,方法包括:S1,构建Rnf157慢病毒过表达质粒;S2,对Rnf157慢病毒过表达质粒进行慢病毒质粒包装,利用Rnf157慢病毒过表达质粒与包装质粒构建Rnf157稳定过表达的细胞株;S3,经过抗性筛选后得到Rnf157基因片段过表达稳定细胞株。本发明在构建过表达载体时采用无缝克隆的方法,构建过程中不受酶切位点的限制,成功率高。本发明在构建过表达载体时在起始密码子前引入Kozak序列,提高了表达效率,在终止密码子前引入核定位信号肽序列,使Rnf157定位在细胞核内,真实模拟了Rnf157在细胞内发挥功能的条件。本发明的细胞株能够稳定表达Rnf157,解决了瞬时转染实验中外源基因过表达维持时间短的缺点。
搜索关键词: 一种 rnf157 基因 片段 表达 细胞株 及其 构建 方法
【主权项】:
暂无信息
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