[发明专利]龋齿预防制剂的制备方法

摘要

公开了编码葡聚糖水解酶之基因的分离和克隆，以及外源性葡聚糖酶基因产物在宿主细胞中的表达和分泌。还公开了龋齿预防制剂和其制备方法及应用，包括转化口腔所固有的微生物宿主细胞，以表达和分泌葡聚糖酶基因产物。

主权项

1.制备含有转化的口腔固有细菌的龋齿预防制剂的方法，其中转化的细菌是用包括以下步骤的方法产生的血链球菌(Streptococcussanguis)：(a)培养环状芽孢杆菌BC-8(BacilluscirculansBC-8)(CCTCCNo.86-020)和/或节细菌CB-8(Arthrobactersp.CB-8)(CCTCCNo.86-021)细菌；(b)从环状芽孢杆菌BC-8(BacilluscirculansBC-8)，(CCTCCNo.86-020)提取α-1，3葡聚糖3-葡聚糖水解酶的基因DNA和/或从节细菌CB-8(Arthrobactersp.CB-8)(CCTCCNo.86-021)提取α-1，6葡聚糖6-葡聚糖水解酶的基因DNA；(c)通过将所述基因DNA插入大肠杆菌(Escherichiacoli)的DNA质粒来建构第一重组质粒DNA；(d)通过将所述的第一重组质粒DNA引入大肠杆菌(Escherichiacoli)来转化所述大肠杆菌；(e)选择已被插入大肠杆菌(Escherichiacoli)的质粒DNA中并且具有所述步骤(d)中有效转化的大肠杆菌(Escherichiacoli)的基团DNA；(f)通过将所述步骤(e)中选择的所述基因DNA插入到血链球菌(Streptococcussanguis)的质粒DNA中来建构第二重组质粒DNA；以及(g)通过将所述第二重组质粒DNA引入到血链球菌(Streptococcussanguis)中表达所述基因DNA来转化所述血链球菌。