[发明专利]控制植物病毒病的基因工程方法

摘要

本发明是一种控制植物病毒病的基因工程方法。通过向植物导入平常不表达或只表达成负链RNA的能强烈抑制宿主蛋白质合成的毒蛋白嵌合基因，在病毒感染的细胞中经病毒诱导转录转译生成毒蛋白，反馈地抑制该病毒的复制和在植物中的扩散。适于控制含亚基因组正链RNA病毒或不含亚基因组正链RNA病毒、以及DNA病毒引起的一年生、多年生、无性繁殖、有性繁殖的植物的病毒病。此法对植物本身、人畜和环境无不良影响。

主权项

1、本发明属基因工程领域，是一种控制植物病毒病的基因工程方法，其特征在于向植物导入平常不能表达成蛋白质，但在被病毒感染的细胞中能表达成毒蛋白的嵌合基因，使被感染细胞“自杀”，从而控制病毒病。具体方法是：(1)毒蛋白基因读码框5′端接上一段或串联接上几段被一或几种病毒的复制酶利用来从负链RNA产生正链亚基因组RNA所要的碱基序列，重组成在宿主植物中能表达为负链毒蛋白RNA的嵌合基因；(2)毒蛋白基因读码框5′端接上被几种病毒的复制酶共同识别和利用来从负链RNA产生正链亚基因组RNA所要的同源碱基序列，重组成在宿主植物中能表达为负链毒蛋白RNA的嵌合基因；(3)毒蛋白基因读码框5′端接上病毒RNA完整的5′端非转译区，重组成在宿主植物中能表达为负链毒蛋白RNA的嵌合基因；(4)用DNA病毒的一个必需在该病毒产物诱导下才表达的基因的被该病毒产物识别顺序和毒蛋白基因读码框组成在植物中能表达为正链毒蛋白RNA的嵌合基因；(5)用植物中只在病毒入侵后才特异诱导表达的基因的启动子或增强子加启动子与毒蛋白读码框组成在植物中能表达为正链毒蛋白RNA的嵌合基因；(6)嵌合基因有强启动子，使正链毒蛋白RNA高效转译的碱基顺序和使负链和正链RNA稳定的顺序，嵌合基因通过农杆菌Ti载体或DNA直接转移法导入植物。