[发明专利]水稻总DNA自主复制顺序的分离方法无效
| 申请号： | 88107498.5 | 申请日： | 1988-11-08 |
| 公开（公告）号： | CN1042566A | 公开（公告）日： | 1990-05-30 |
| 发明（设计）人： | 任大明;石红;庞坚 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12N1/16;C12N1/20;C12P19/34;A01H1/00 |
| 代理公司： | 复旦大学专利事务所 | 代理人： | 陶金龙 |
| 地址： | 上海市邯郸*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 以能在大肠杆菌复制，但不能在酵母菌中复制的YIp5质粒作为克隆载体，鸟枪法克隆了水稻总DNA中的ARS顺序。本发明采用了两步转化法，即首先用连接反应液转化大肠杆菌，再用大肠杆菌转化子的混合质粒库去转化酵母菌，起了“放大”作用，增加了筛选转化子的机会。改进的酵母再生培养基提高了转化频率。 | ||
| 搜索关键词： | 水稻 dna 自主 复制 顺序 分离 方法 | ||
【主权项】：
1、一种将载体质粒DNA和供体DNA经完全酶切，然后混合连接去转化酵母菌，并筛选转化子以分离水稻总DNA中ARS顺序的分离方法，其特征在于，上述的供体DNA为水稻总DNA，且载体和供体DNA分别酶切，连接后首先转化大肠杆菌，再将混合的大肠杆菌转化子制备成混合的质粒DNA库，然后再用这些扩增后的质粒DNA去转化酵母菌，最后再筛选转化子。
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