[发明专利]固定化α-葡糖基转移酶制备帕拉金糖

摘要

一种利用固定化α-葡萄基转移酶制备帕拉金糖的方法，属生物技术中的酶工程。该方法包括α-葡糖基转移酶的菌种发酵，固定化，使蔗糖溶液转化，浓缩结晶而制得帕拉金糖产品，该方法采用流加营养源发酵培养菌体细胞，细胞固定化技术中使用高岭土为主要成分的粘土类作为添加剂吸附细胞等以及提供一套优化的工艺条件，还提出了非传统的内胶凝法细胞固化工艺。以上方法工艺简单，材料便宜易得，酶活高，有利于提高帕拉金糖转化率和产量，便于广泛推广应用。

主权项

1、一种利用固定化酶使蔗糖转化并制备帕拉金糖的方法，包括含有α-葡糖基转移酶的菌种发酵增殖、浓缩、固定化、转化蔗糖溶液为帕拉金糖、帕拉金糖转化液浓缩、结晶或直接凝固、干燥步骤，其特征在于：(1)菌种为SeratiaplymuthicaATCCl5928菌种的培养物；(2)采用在培养基中边发酵边流加营养源的方法发酵增殖菌体细胞，以制备α-葡糖基转移酶(α-glucosyltransferase)，其发酵培养基组分含1-6％(W/V)蔗糖，0.5-5％(W/V)过滤除去沉淀物的玉米浆、0.01-0.4％(W/V)KCl，流加的营养源为浓度1-7％的酵母膏或1-8％的玉米浆以及1-15％的蔗糖溶液，发酵过程温度为25-35℃，pH5.0-8.5，搅拌，发酵时间为8-24小时，在发酵期间内边发酵边流加营养源，流加营养源的时间控制在1-20小时内，于对数生长期收获菌体细胞；(3)使用高岭土或粘土为添加剂作为支撑物并吸附菌体细胞，用海藻酸钠包埋、再用CaCl2溶液将所包埋材料固定成型，再用戊二醛处理交联，同时杀灭活细胞以制备α-葡糖基转移酶的固定化酶，用于吸附菌体细胞并作支撑物的高岭土或粘土的用量为发酵液的2-30％(W/V)，粒度为100-300目，所说的海藻酸钠的用量为1-6％(W/V)，细胞包埋量为5-50％(WWC％)，所用CaCl2溶液的浓度为0.1-0.8％；(4)将固定化酶装在填充式柱反应器内，流加浓度为5-75％的蔗糖溶液，使蔗糖溶液转化为帕拉金糖转化液，调整流速控制转化率在60-100％之间。