[发明专利]检测红细胞免疫功能的试剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种检测红细胞免疫功能的试剂的制备方法，它是从空气、人体分泌物、植物和食品中分离出酵母株，经过优选、培养、收集洗涤、加助剂补体致敏和真空冷冻干燥五个步骤得到酵母菌的冻干致敏试剂。本试剂制备工艺科学合理，便于大规模推广制备，所得的酵母菌试剂特异形态少，细胞均一，分散均匀，保存使用期长，可达一年左右，使用时性能稳定、敏感性高、着色及分散度好，试验结果易于观察。

主权项

1、一种检测红细胞免疫功能的试剂的制备方法，其特征在于它是经过酵母株优选、培养、收集洗涤、加助剂补体致敏和真空冷冻干燥五个步骤进行：(1)、酵母株的优选：把从空气、人体分泌物、植物和食品中分离的酵母菌接种于改良沙氏培养基上，在28℃培养72小时，改良沙氏培养基为1000毫升蒸馏水中加入蛋白胨10克，葡萄糖30克，然后选出菌体较大，形态为圆形或椭圆形、细胞规整、特异形态少的Ys酵母株，为优选酵母株，(2)、酵母株的培养：将优选出的Ys酵母株接种在改良沙氏培养基中，在28℃培养66小时，以不出现芽胞为限，(3)、酵母菌的收集和洗涤：将培养好的酵母菌隔水煮沸10分钟，进行灭活，然后离心去掉上清液，将收集到的酵母菌经多次水洗配成1×108/ml，隔水煮沸30分钟，并加入防腐剂NaN3，即为悬液酵母未致敏试剂，(4)、悬液酵母试剂加助剂和进行补体致敏：将悬液酵母试剂加入赋形剂和保护剂脱脂牛乳；或将悬液酵母试剂加入等体积的1∶10生理盐水稀释豚鼠血清在37℃维持15分钟，水洗3次，加入赋形剂和保护剂脱脂牛乳，(5)、真空冷冻干燥：经步骤(4)制备的补体未致敏或致敏的酵母菌制剂悬浮液进行冷冻干燥和真空封装，其操作条件是在0.03托真空条件下，经-40℃冷冻处理1小时，然后在30℃干燥14小时，使成品水份小于1％，进行真空封装，制成冻干补体未致敏和冻干补体致敏酵母试剂。