[发明专利]枯草杆菌蛋白酶变异体

摘要

公开了衍生自天然或重组的非人体羰基水解酶的新变异体。一般，这种变异羰基水解酶是通过体外修饰编码天然或重组羰基水解酶的前体ＤＮＡ序列，使其仅编码前体氨基酸序列中的多个取代的氨基酸残基。与前体水解酶相比，变异羰基水解酶具有不同的性质如不同的蛋白水解活性，稳定性等。被取代的氨基酸残基对应于解淀粉芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶残基＋７６位置的残基结合一个或多个选自下组的残基＋９９、＋１０１、＋１０３、＋１０４、＋１０７、＋１２３、＋２７、＋１０５、＋１０９、＋１２６、＋１２８、＋１３５、＋１５６、＋１６６、＋１９５、＋１９７、＋２０４、＋２０６、＋２１０、＋２１６、＋２１７、＋２１８、＋２２２、＋２６０、＋２６５和／或＋２７４。

主权项

1.一种枯草杆菌蛋白酶变异体，其特征在于，它具有衍生自前体枯草杆菌蛋白酶的、在自然界没有发现的氨基酸序列，它在相当于下列位置的多个氨基酸残基处具有不同的氨基酸取代：76/99，76/101，76/103，76/104，76/107，76/123，76/99/101，76/99/103，76/99/104，76/101/103，76/101/104，76/101/104，76/104/107，76/104/123，76/107/123，76/99/101/103，76/99/101/104，76/99/103/104，76/101/103/104，76/103/104/123，76/104/107/123，76/99/101/103/104，76/99/103/104/123，76/99/101/103/104/123，76/103/104/126，76/103/104/135，76/103/104/197，76/103/104/222，76/103/104/260，76/103/104/265，76/103/104/126/265，27/76/104/123/274，27/76/104/109/123/274，27/76/104/123/218/274，27/76/104/123，27/76/104/107/123，27/76/104/109/123，27/76/104/109/123/218/274，27/76/104/123/197，27/76/104/123/204，27/76/104/123/206，27/76/104/123/216，27/76/104/123/218，27/76/104/123/260，27/76/104/123/195/197，27/76/104/123/195/218，27/76/104/123/197/218，27/76/104/123/204/218，27/76/104/123/206/218，27/76/104/123/218/260，27/76/104/123/195/197/218，76/103/104/217，76/103/104/156，76/103/104/166，76/103/104/105，76/101/103/104，76/103/104/128，76/103/104/210，76/103/104/107，76/103/104/204，76/217，和76/103/104/156/166，其中，上述位置的取代氨基酸如下：氨基酸残基位置取代氨基酸+76D，H+99D，T，N，G+101R，G，D，K，L，A，E+103A，Q，T，D，E，Y，K，G，R+104I，Y，S，L，A，T，G，F，M，W，D，V，N+107V，L，Y，G，F，T，S，A，N+123S，T，I+27K+105A，D+109S，K，R+126A，I，V，F+128G，L+135I，A，S，F，V+156E，D，Q+166D，G，E，K，N，A，F，I，V，L+195E+197E+204A，G，C+206L+210I，S，C+216V+217H，I，Y，C，A，G，F，S，N，E，K+218S+222A，Q，S，C，I，K+260P，A，S，N，G+265N，A，G，S+274A，S