[发明专利]五种尿激酶变体基因及在大肠杆菌中的表达

摘要

本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产多肽药物的技术领域，其目的是利用寡核苷酸介导的定点突变，改造人尿激酶基因，获得五种尿激酶变体基因，即（Lys151→Glu)UK,(Lys151→Glu,Arg154→Gly)UK,(Lys151→Glu,Arg154→Glu)UK,(Arg154→Gly)UK和(Arg154→Glu)UK，并实现在大肠杆菌中的高效表达，经分离纯化，创造五种溶栓效果好，对血栓中纤维蛋白有较高选择性的尿激酶变体蛋白，以解决临床治疗血栓疾病时的出血副作用，提高用药安全性。

主权项

1一种对纤维蛋白有较高选择性的尿激酶变体基因，其特征在于，它选自下列尿激酶变体基因中的一种：通过寡核苷酸介导的定点突变，将尿激酶基因中第151位赖氨酸(Lys)密码子AAG改为谷氨酸(Glu)密码子GAG所构建的尿激酶变体基因(Lys151→Glu)UK；将尿激酶基因中第151位Lys密码子AAG改为Glu密码子GAG和第154位精氨酸(Arg)密码子AGG改为甘氨酸(Gly)密码子(GGG)所构建的尿激酶变体基因(Lys151→Glu，Arg154→Gly)UK；将尿激酶基因中第151位Lys密码子AAG和第154位Arg密码子AGG都改为Glu密码子GAG所构建的尿激酶变体基因(Lys151→Glu，Arg154→Glu)UK；将尿激酶基因中第154位Arg密码子AGG为Gly码子GGG所构建的尿激酶变体基因(Arg154→Gly)UK；将尿激酶基因中第154位Arg密码子AGG改为Glu密码子GAG所构建的尿激酶变体基因(Arg154→Glu)UK。