[发明专利]从石蜡包埋组织中提取核酸进行基因扩增的方法

摘要

本发明涉及一种从石蜡包埋组织中提取核酸进行基因扩增的方法,该方法采用二甲苯脱蜡法或水浴脱蜡法,再提取核酸DNA进行基因PCR扩增,采用该方法能充分利用石蜡包埋的病理标本组织为能使肿瘤等疾病在基因水平上进行回顾性分析,做出了一个良好开端,并对进一步加强基础理论研究与临床的配合,深入探讨疾病的发生、演变及预后关系,正确评价临床治疗以及加深理解肿瘤生物学特性与临床表现的关系,都有着十分重要的现实意义。

主权项

1、一种从石蜡包埋组织中提取核酸进行基因扩增的方法，其特征在于，该方法采用二甲苯脱蜡法：首先将石蜡包埋组织块切成薄片，加入二甲苯微微摇动，换液3次，时间为12小时，用浓度为100％、90％、75％、50％、25％的乙醇呈梯度水化，间隔30分钟浸洗一次，弃上清液，剪碎组织，加入含有十二烷基磺酸钠和蛋白酶K配制的溶液，置37℃恒温水浴3天，等体积饱和酚萃取一次，用氯仿-异戊醇24∶1萃取两次，加醋酸钠，用两倍体积无水乙醇沉淀核酸DNA，离心，在TE缓冲液中溶解核酸DNA，经紫外分光光度计测其含量后，加入等体积的双蒸水，经RNase37℃水浴30分钟，再次用氯仿-异戊醇萃取，用醋酸钠、乙醇沉淀，离心沉淀，0.8％琼脂糖凝胶电泳，将核酸DNA大片段切出，进行电洗脱，洗脱后的核酸DNA经沉淀后用双蒸水溶解，经电泳检测后，用基因PCR法进行扩增。