[发明专利]带有非天然核苷酸的嵌合突变载体

摘要

本申请涉及称为嵌合突变载体(CMV)的小双螺旋寡核苷酸和核苷酸类似物的寡聚物的设计和应用,CMV通过与目的基因的同源重组作用于真核细胞目的基因的突变。CMV包括核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸及它们的类似物(统称“核碱基”)。本申请公开CMV包含至少两个最少有三个与脱氧核糖型核碱基配对的核糖型核碱基的片段,位于CMV中相应于向目的基因导入突变的区域的两侧。所述核糖型核碱基优选是核酸酶抗性的,即不是天然存在的核糖核苷酸。CMV的应用包括遗传病的基因治疗和构建转基因植物和动物。

主权项

1．一种向真核细胞基因导入转变的寡核碱基化合物，包含：a)有一个3’端点和一个5’端点的第一核碱基链，该第一链包含：1)总共至少15个核碱基；2)至少三个选自2’AX-核苷，2’AX-类核苷酸，和2’AR-核苷酸的核酸酶抗性的核糖型核碱基，其中A=O,F,Cl，或Br；当A=O时，则X=H或C1-6烷烃和R=C1-6烷烃；当A≠O时，则X和R可忽略，3)至少3个连续的核糖型核碱基，是与核酸酶抗性的核糖型核苷酸相同或其外的，b)有一个3’端点和一个5’端点的第二核碱基链，该第二链的核碱基与第一链核碱基Watson-Crick配对，其中所述第一链的连续核糖型核碱基与2’-脱氧核糖型核碱基Watson-Crick配对，且其中至少一个核糖型核碱基不是2’O-甲基取代核苷酸。