[发明专利]同源重组中的正负筛选有效
| 申请号： | 98810394.X | 申请日： | 1998-10-20 |
| 公开（公告）号： | CN1146666C | 公开（公告）日： | 2004-04-21 |
| 发明（设计）人： | J·奥尔;R·斯宾杰;K·霍诺德 | 申请（专利权）人： | 罗切诊断学有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N15/65;C12N15/82 |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人： | 樊卫民 |
| 地址： | 德国*** | 国省代码： | 德国;DE |
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| 摘要： | 本发明涉及一种通过同源重组向目标细胞基因组中导入异源DNA的方法。本发明还涉及适于同源重组的DNA构建体。 | ||
| 搜索关键词： | 同源 重组 中的 正负 筛选 | ||
【主权项】：
1.一种通过同源重组将异源DNA导入宿主细胞的方法，其中宿主细胞用含有两个侧翼核苷酸序列的重组载体转染，所述侧翼核苷酸序列与宿主细胞基因组中的目标序列同源，且编码正选择标记的核苷酸位于两个侧翼核苷酸序列内侧，编码负选择标记的核苷酸序列位于两个侧翼核苷酸序列外侧，选择标记基因与在宿主细胞中有活性的表达控制序列有效连接，其中使用一种或多种编码位于细胞表面多肽的核苷酸序列作为负选择标记，使得在载体通过同源重组整合入细胞基因组后负选择基因不表达，在载体通过随机整合入细胞基因组后负选择基因表达，且其基因产物出现在细胞表面。
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