[发明专利]重组杆状病毒及其构建方法，以及含该病毒的杀虫组合物

摘要

一种重组杆状病毒，它产生一种由杆状病毒多角体蛋白(PH)、苏云金芽胞杆菌晶体蛋白(CP)和多管水母aequorea victoria绿色荧光蛋白(GFP)构成的重组多角体，该病毒的构建通过：将携带编码融合蛋白(其中PH、CP和GFP依次直接从N-末端到C-末端相连)的融合基因的转移载体和野生型杆状病毒同时引入昆虫细胞，并培育该细胞。该杆状病毒转移载体pColorBtrus通过下列步骤构建：用聚合酶链式反应合成来自质粒pGFP的编码GFP的DNA片段、来自野生型苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒的PH基因、以及来自携带有苏云金芽胞杆菌CrylAc基因的质粒pPN6.6的CrylAc基因；首先将编码GFP的DNA片段和PH基因，以编码GFP的DNA片段的5’末端和PH基因的3’末端连接的方式，插入杆状病毒表达载体pAcUW31，以及然后将CrylAc基因插入PH基因和编码GFP的DNA片段之间。重组病毒能高致病性的在短时间内杀死有害昆虫并且配备一种监测被感染昆虫的装置，从而能防止过度使用。

主权项

1.一种重组杆状病毒，其特征在于，该病毒含有两个独立转录单元：(a)一个转录单元，含有编码与启动子连接的杆状病毒多角体蛋白的核苷酸序列；(b)一个转录单元，含有编码与多角体蛋白启动子连接的融合蛋白的核苷酸序列，所述融合蛋白中杆状病毒多角体蛋白、苏云金芽孢杆菌晶体蛋白和多管水母Aequorea victoria绿色荧光蛋白依次从N-末端到C-末端连接；其中该杆状病毒产生重组多角体，所述重组多角体由杆状病毒多角体蛋白、苏云金芽孢杆菌晶体蛋白和多管水母Aequorea victoria绿色荧光蛋白组成。