[发明专利]一种蚓激酶制备工艺无效
| 申请号： | 99112806.0 | 申请日： | 1999-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN1089369C | 公开（公告）日： | 2002-08-21 |
| 发明（设计）人： | 孙启良 | 申请（专利权）人： | 孙启良 |
| 主分类号： | C12N9/68 | 分类号： | C12N9/68;C12N9/00 |
| 代理公司： | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 | 代理人： | 陈宏伟 |
| 地址： | 130041*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种蚓激酶制备工艺，将蚯蚓经生理盐水处理，采用匀浆、冻融法制备蚯蚓粗提物，然后通过超滤、亲和层析、离子交换及分子筛等技术组合，从蚯蚓中提取纯化三种有纤溶活性的蚓激酶，其分子量分别为3.0±0.2万、2.5±0.2万及2.2±0.2万的三种蛋白质，其纯度分别达到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示一条带，高效液相色谱(HPLC)呈现一个峰的水平，其纤溶活性均为每mg含相当于尿激酶活性1000单位以上。体外溶血栓试验证明有良好的直接溶栓作用；动物体内试验证明，其体内溶血栓活性优于尿激酶。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 激酶 制备 工艺 | ||
【主权项】：
1、一种蚓激酶制备工艺，包括以下工艺制备：将蚯蚓用清水洗净泥土，加入生理盐水冲洗处理，按(V/V)1∶3～5的比例加入0.2MpH4.6～4.8的柠檬酸钠制成匀浆，经1000～4000rpm离心20～40分钟，取上清液，通过超滤法去除大分子蛋白，滤液用亲和层析法初步纯化，收集活性组分，再通过离子交换柱进一步纯化，取其活性组分，再经分子筛层析，分段收集各个活性组分，取分子量为3.0±0.2万、2.5±0.2万及2.2±0.2万的三种活性蛋白质。
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