[发明专利]栀子细胞组织培养产生天然生根剂的方法

摘要

一种栀子细胞组织培养生产天然生根剂的方法，该方法包括栀子细胞组织的建立、培养及栀子甙提取步骤，其特征在于：(1)采用的栀子细胞组织是由栀子叶诱导产生的愈伤组织；(2)所使用的培养基为改良的MS培养基；(3)栀子细胞的培养条件：(a)固体培养：改良的MS固体培养基，接种重1～5g/100ml，温度20～30℃，湿度60～85％，光强1000～3000lx；(b)液体培养：改良的MS液体培养基，接种量1～5g/100ml，温度20～30℃，转速50～150rpm，光强1000～3000lx。本发明可以实现大规模地工业生产，不受季节和土地面积的限制。

主权项

1.一种栀子细胞组织培养生产天然生根剂的方法，所生产的生根剂中除含有部分色素和糖外，主要含有栀子甙1～9‰，羟异栀子甙1～9‰，京尼平-1-0-龙胆双糖甙1～9‰，该方法包括栀子细胞组织的建立、培养及栀子甙提取步骤，其特征在于：(1)采用的栀子细胞组织是由栀子叶诱导产生的愈伤组织；栀子愈伤组织的诱导过程是：取栀子植株上的叶片，清洗，消毒，切片，平铺在改良的固体MS培养基上，温度为20～30℃，湿度60～85％，光强1000～3000lx条件下培养20～40天，叶片切口部分隆起，长出的一团团淡黄色细胞团即为栀子愈伤组织；(2)所使用的培养基为改良的MS培养基，组分如下：大量元素：NHL4NO31000～2000(mg/L)KNO31500～2500CaCl2·2H2O300～500MgSO4·7H2O150～200微量元素：KI1.5～1.7H3BO35.5～7.0MnSO4·7H2O20～25ZnSO4·7H2O5～15Na2MoO4·2H2O0.1～0.5CuSO4·5H2O0.01～0.03CoCl2·6H20.01～0.03Na2EDTA35～40FeSO4·7H2O20～30生长调节物质：肌醇80～120烟酸0.3～0.7盐酸吡哆醇B10.3～0.7盐酸硫胺素B60.05～0.2甘氨酸1.0～3.0α-萘乙酸(NAA)0.5～5激动素(KT)0.05～0.5蔗糖1.0～5.0琼脂0～5.0pH值5.0～6.5(3)栀子细胞的培养条件(a)固体培养改良的MS固体培养基，接种量1～5g/100ml，温度20～30℃，湿度60～85％，光强1000～3000lx；(b)液体培养改良的MS液体培养基，接种量1～5g/100ml，温度20～30℃，转速50～150rpm，光强1000～3000lx；(4)将栀子细胞用甲醇浸提，得栀子甙的提取液。