[发明专利]不结球白菜原生质体培养及再生植株方法无效
申请号: | 99114127.X | 申请日: | 1999-03-29 |
公开(公告)号: | CN1108096C | 公开(公告)日: | 2003-05-14 |
发明(设计)人: | 侯喜林;曹寿椿;佘建明;蔡小宁;陆维忠 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 南京经纬专利代理有限责任公司 | 代理人: | 楼高潮,王睿 |
地址: | 210014 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明属于植物原生质体培养及植株再生方法,专用于不结球白菜原生质体培养再生植株。所提供的不结球白菜原生质体培养及植株再生方法具体步骤如下取5天苗龄的不结球白菜萝卜细胞质雄性不育材料下胚轴或14~18天苗龄子叶,在1.0~2.0%(M/V)纤维素酶+0.1~1.0%(M/V)果胶酶+10mMCaCl2·2H2O+0.7mMKH2PO4+0.5M甘露醇的酶液中游离25~60hr,500rpm下离心收集原生质体;原生质体在KM8P1+2,4-D0.5mg/L+6-BA0.25mg/L+NAA0.5~1.0mg/L的培养基上,培养3周形成愈伤组织;经MS+2,4-D1.0mg/L增殖愈伤组织;在培养基为MS+6-BA10.0mg/L+NAA0.3mg/L上芽分化。将上述分化芽在MS培养基上生根,2周后即可获得完整的再生植株。使用该方法,植株再生率为1.8%。 | ||
搜索关键词: | 不结球 白菜 原生 质体 培养 再生 植株 方法 | ||
【主权项】:
1.不结球白菜原生质体再生植物的方法,具体步骤如下:1)取5天苗龄的不结球白菜萝卜细胞质雄性不育材料下胚轴或14~18天苗龄的子叶,在1.0~2.0%(M/V)纤维素酶+1.0%(M/V)果胶酶+10mMCaCl2·2H2O+0.7mMKH2PO4+0.5M甘露醇的酶液中游离25~60hr,500rpm下离心收集原生质体;2)原生质体在KM8P1+2,4-D0.5mg/L+6-BA0.25mg/L+NAA0.5~1.0mg/L的培养基上,培养3周形成愈伤组织;3)经MS+2,4-D1.0mg/L增殖愈伤组织;4)在培养基为MS+6-BA10.0mg/L+NAA0.3mg/L上形成不定芽。
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