[发明专利]一种藻蓝蛋白的制备方法无效
申请号: | 99116402.4 | 申请日: | 1999-03-26 |
公开(公告)号: | CN1268516A | 公开(公告)日: | 2000-10-04 |
发明(设计)人: | 金传荫;刘永定;王高鸿;沈强;何家菀;宋立荣 | 申请(专利权)人: | 中国科学院水生生物研究所 |
主分类号: | C07K1/36 | 分类号: | C07K1/36 |
代理公司: | 中国科学院武汉专利事务所 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430072*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种藻蓝蛋白的制备方法,以鲜藻为原料,首先提取粗滤液,鲜藻脱水后,加入缓冲液,混匀,然后置-20℃~-10℃冰冻,冻结后,取出置室温下融溶,冻融3—5次,用板框过滤;其次是超滤纯化,用截留分子量为十万道尔顿的超滤膜,经过微滤的粗提液使分子量在十万道尔顿以下各种物质,透过超滤膜而被清除;第三是静置-澄清纯化,经过超滤纯化的藻蓝蛋白的分部,除去分子量十万道尔顿以下小分子,同时进行浓缩,经浓缩的藻蓝蛋白分部在3—5℃保藏;第四是羟基磷灰石柱层析纯化。本发明方法简便,纯化和浓缩效率高,具有社会、环境和经济效益。 | ||
搜索关键词: | 一种 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】:
1、一种藻蓝蛋白的制备方法,其特征是:A、提取粗滤液,鲜藻脱水后,加入缓冲液(PH5.0-9.0),混匀,然后置-20℃~-10℃冰冻,冻结后,取出置室温下融溶,冻融3-5次,用板框过滤;B、超滤纯化,采用截留分子量为十万道尔顿的超滤膜,经过微滤的粗提液,使分子量在十万道尔顿以下各种物质,透过超滤膜而被清除;C、静置-澄清纯化,经过超滤纯化的藻蓝蛋白的分部,除去了分子量十万道尔顿以下的小分子,同时进行浓缩,经浓缩的藻蓝蛋白分部在3-5℃保藏2-3天;D、羟基磷灰石柱层析纯化,通过静置-澄清的材料上羟基磷灰石柱,使柱的1/3着染,用0.001-0.25M浓度的磷酸缓冲液分步洗脱。
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