[发明专利]释放细胞内的L-天门冬酰胺酶的溶液及方法无效
申请号: | 99116930.1 | 申请日: | 1999-09-30 |
公开(公告)号: | CN1120239C | 公开(公告)日: | 2003-09-03 |
发明(设计)人: | 赵凤生 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N9/82 | 分类号: | C12N9/82;// |
代理公司: | 上海交达专利事务所 | 代理人: | 王锡麟,马伟敏 |
地址: | 200030*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 一种释放细胞内的L-天门冬酰胺酶的溶液及方法属于生物化学类领域。将大肠杆菌培养液离心沉淀或过滤,除去液体,得到细胞,用水和磷酸盐、Triton类表面活性剂配制成溶液,将大肠杆菌细胞加入到溶液中,搅拌或振摇一段时间,酶即从细胞内释放到液体中,再经离心沉淀或过滤,除去细胞,溶液中的酶用于进一步纯化,操作温度为4-37℃,酶释放时间4-20小时。溶液配制为磷酸盐10%-15%,Triton类表面活性剂1%-45%,其余为水,所述的磷酸盐为含有钾盐或钠的正盐或酸式盐。本发明降低原料成本45%。酶释放率在60%以上。优化条件下的释放率可达70%-80%。对纯度要求不高,用过的磷酸盐可以回收再次使用。 | ||
搜索关键词: | 释放 细胞内 天门冬 酰胺酶 溶液 方法 | ||
【主权项】:
1、一种释放细胞内的L-天门冬酰胺酶的方法,其特征在于将大肠杆菌培养液离心沉淀或过滤,除去液体,得到细胞,用水和磷酸盐、Triton类表面活性剂配制成溶液,将大肠杆菌细胞加入到溶液中,置于搅拌釜中搅拌,或置于摇瓶中振摇一段时间,酶即从细胞内释放到液体中,再经离心沉淀或过滤,除去细胞,溶液中的酶用于进一步纯化,操作温度为4-37℃,酶释放时间4-20小时。
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