[发明专利]慢粒人原代干祖细胞模型的构建方法及应用

权利要求书

1、一种建立慢粒人原代干祖细胞模型的方法，其特征在于：从脐带血中获得人原代CD34+干祖细胞，在病毒流式转染系统上，转染M-p210-G载体，结合流式细胞仪筛选出转染成功了的CD34+细胞。

2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于：以人原代干祖细胞构建模型能够有效地再现人慢粒的特性。

(1)、p210^BCR/ABL在转染细胞中高效表达。

(2)、p210减弱细胞粘附作用。

(3)、p210增加细胞粘附介导的迁移性能。

(4)、p210对粘附介导的增殖抑制的作用。

(5)、p210增加CD34+细胞的增殖力。

(6)、p210抑制细胞凋亡。

(7)、p210对细胞分化的作用，可使髓系细胞异常分化。

(8)、p210上调p27活性。

3、根据权利要求1所述的方法，其特征在于：人慢粒原代干祖细胞模型的细胞仍保持原细胞的多向分化、增殖潜能及表型，体外可长期稳定表达修饰的基因。

4、根据权利要求1所述的方法，其特征在于：采用逆转录病毒载体，整合并高效表达p210^BCR/ABL癌基因于人原代干祖细胞群。

5、根据权利要求1所述的方法，其特征在于：逆转录病毒载体与pCL质粒共同转染293Kj细胞，制备含p210^BCR/ABL修饰基因的高滴度病毒上清，采用包被转孔膜培养器流式病毒转染法转染人原代干祖细胞。

6、根据权利要求1所述的方法，其特征在于：利用人原代干祖细胞慢粒模型细胞建立造血干相细胞系。