[发明专利]3,6支化的甘露三糖的简易合成

说明书

本发明属于有生物活性的寡糖的制备领域，特别是涉及能用于药物筛选的寡糖的合成方法。

与天冬酰胺连接的寡糖链简称N-糖链，它通常包含一个五糖核心区，如下图所示，此五糖核心称为三甘露糖五糖核心。N-糖链的结构特征为包含有至少一个在甘露糖上3,6二支化的寡糖二天线，此外，带有5-9个甘露糖的高甘露糖型N-糖链是复杂型N-糖链合成的前身，故肿瘤糖蛋白中高甘露糖型糖链的出现或增多是提示由于细胞恶性增殖、糖蛋白合成速度增加的需要而致糖链加工不完全、不成熟。合成甘露核心三糖是制备相关抗原或诊断试剂的基础，是糖生物学研究必备的基本原料。另外，甘露核心三糖与CoA的结合可应用于该蛋白的分离提纯，具有潜在的工业应用前景。

本发明的目的在于将上述甘露核心三糖的合成用一锅多步的模式完成，较已报道的方法大大简化，适于批量制备。

本发明的合成方法在于：

以3,6-二羟基-2,4-二-氧-酰基-α-D-甘露糖苷为受体，以甘露糖Schmidt试剂为糖基供体，以路易斯酸为催化剂，简易合成甘露三糖。

在吡啶或吡啶和DMF的混合溶剂体系中，以甘露糖苷1为起始物，一锅三

步法合成3,6位二硅烷化，2,4位酰化的α-D-甘露糖苷3。TBTPS=tert-Butyldiphenysilyl、R=Benzoyl or acetyl,TBDMS=tert-ButyldimethylsilylR’=Alkyl or aryl

将全取代的甘露糖苷3以＜3％氯化氢的二氯甲烷溶液或氢化钠-六甲基磷酰

胺处理，可选择性地脱除6位硅烷基，得到6位为游离羟基的甘露糖苷4。

再脱除3位的硅烷基，可得到3,6二羟基的化合物6，而以4为原料，可合

成1-6连接的寡糖。TBTPS=tert-Butyldiphenysilyl,R=Benzoyl or acetyl,TBDMS=tert-ButyldimethylsilylR’=Alkyl or aryl

将全取代的甘露糖苷3以对甲苯磺酸的吡啶盐处理，选择性地脱除3位硅烷基，得到3位为游离羟基的甘露糖苷5。再脱除6位的硅烷基，可得到3,6二羟基的化合物6，而以5为原料，可合成1-3连接的寡糖。TBTPS=tert-Butyldiphenysilyl,R=Benzoyl or acetyl,TBDMS=tert-ButyldimethylsilylR’=Alkyl or aryl

将全取代的甘露糖苷3以90％三氟乙酸处理，可同时脱除3,6二硅烷基，得到3,6位为游离羟基的单一产物6。TBTPS=tert-Butyldiphenysilyl,R=Benzoyl or acetyl,TBDMS=tert-ButyldimethylsilylR’=Alkyl or aryl

将6与苯甲酰化或乙酰化的甘露糖Schmidt试剂7反应，得到取代的甘露三糖8。

R=Benzoyl or acetyl R’=Alkyl or aryl

以1,2乙叉基甘露糖9为糖基受体，苯甲酰化或乙酰化的甘露糖的Schmidt试剂7为糖基供体，在路易斯酸催化下，亦能简易地合成甘露三糖：

将1摩尔的1,2乙叉基甘露糖9与2.1摩尔的苯甲酰化或乙酰化的Schmidt试剂7，溶于二氯甲烷中，在低温，路易斯酸催化下反应，得到3,6连接的三糖10，用常规方法酰化，得到全保护的三糖11。

R=Benzoyl or acetyl

将11的乙叉基在酸性条件下脱除，再用常规方法乙酰化，接着在路易斯酸催化下，与对甲氧基酚偶联，即得到能继续反应的三糖供体。

R=Benzoyl or acetyl PMP=para-Methoxybenzyl所述的路易斯酸为三氟化硼、三甲基硅三氟甲磺酸盐(TMSOTf)。

下面结合实施例对本发明进行详细的说明。(1)3,6-二-氧-硅烷基-α-D-甘露吡喃糖甲基苷3的合成