[发明专利]一种新的多肽——人性别决定蛋白14和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人性别决定蛋白14，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在生物体的多种蛋白中均含有各种不同类型的锌指结构域，锌指结构域根据其锌原子结合的数目及位置的不同可分为以下几类：C2H2型、CCHC型、CCCH型及C3HC4型等，其中C2H2型锌指结构域的分布最为广泛。C2H2型锌指结构域最早在蛋白转录因子ⅢA中被得到，是真核生物转录因子中分布最广的DNA结合结构域。C2H2型锌指结构域含有如下所示的保守序列片段：(Tyr,Phe)-X-Cys-X(2,4)-Cys-X3-Phe-X5-Leu-X2-His-X(3,5)-His(其中X表示任意氨基酸残基；半胱氨酸与组氨酸与锌原子形成配位键，结合锌原子；其它三个保守的氨基酸残基形成疏水性中心区域；其它变化的氨基酸残基负责介导蛋白与其它分子的相互作用)。这一结构域在生物体内独立完成自己的生理学功能。在很多情况下，含有锌指结构域的蛋白与特殊的双链及单链DNA序列相互作用，起着转录调节因子的作用。现有研究发现，C2H2型锌指结构域不仅在一些组织的基因表达过程中起重要的调节作用，其在发育调节过程亦起着非常关键的作用。

转录因子S-Ⅱ(TFIIS)是一种真核蛋白，对于RNA多聚酶Ⅱ的转录延长是必需的。该转录因子只有在RNA聚合酶Ⅱ存在时才显示与DNA的结合活性。该转录因子家族的成员均含有一高度保守的区域，这一保守区域含有四个半胱氨酸残基与锌离子结合并折叠成一锌带状结构。除半胱氨酸外，这一保守区域还含有其它保守的氨基酸残基，该保守区域由如下所示的一致性序列片段组成：C-X(2)-C-X(9)-[LIVMQSAR]-[QH]-[STQL]-[RA]-[SACR]-X-[DE]-[DET]-[PGSEA]-X(6)-C-X(2,5)-C-X(3)-[FW]；其中四个半胱氨酸残基为锌配键形成的位点。该序列片段可能是蛋白与核苷酸序列结合的识别位点，其特殊位点的突变将导致蛋白不能正常的与DNA结合，从而影响相关基因在体内的表达。这一蛋白保守序列片段在蛋白调控RNA聚合酶Ⅱ延伸复合物转录活性的过程中其重要作用。含有此序列片段的蛋白在生物体内调控着一些原癌基因及病毒的表达，包括人免疫缺陷型病毒HIV-1的表达[Qian X,Jeon C.et al.,1993,Nature,365:277-279]。其中，保守的序列片段是蛋白发挥作用的主要活性位点，该序列片段在体内通过调节蛋白与DNA的结合，来调节RNA聚合酶Ⅱ的转录延伸。其表达异常将导致一些基因在体内的异常增殖，其通常与生物体内一些免疫缺陷型疾病、各种肿瘤及癌症等疾病的发生相关。

众所周知，绝大多数的生物均具有两种性别，而性别的形成有其固有的发生机制。研究发现，在众多不同生物性别决定基因所编码的蛋白序列中均含有一DNA结合基序，又称之为“DM结构域”[Christopher S.,Raymond et al.,1998,Nature,391:691-694]。该结构域在生物体内通过与一些相关DNA序列及蛋白的相互作用来调控生物体的性别发育过程。该结构域的突变将蛋白相关蛋白的功能异常及生物体的发育异常。含有该蛋白结构基序的蛋白通常在生物体性别发育过程中起重要调控作用，调控着生物性别的发生。该结构域与生物体内与各种性别发育紊乱性疾病、生殖系统发育不良、各种相关组织的肿瘤及癌症等的发生密切相关。

本发明的新的人性别决定蛋白同时含有C2H2型锌指结构域、TFIIS特征性序列片段及与性别发生相关的DM结构域三个功能性结构单位。其在生物体相关组织，尤其是生殖系统的组织中有较高的表达量。该蛋白的三个主要组成成分在生物体内协同作用以调控着一些生物体早期性别发育中重要基因的表达，其表达异常通常与一些性别发育紊乱性疾病、生殖系统发育不良、一些免疫系统疾病及相关组织肿瘤等疾病的发生密切相关。该蛋白还可用于诊断及治疗上述相关的各种疾病。   由于如上所述人性别决定蛋白14蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人性别决定蛋白14蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人性别决定蛋白14蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人性别决定蛋白14以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。